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轉染HGF-1牙齦成纖維細胞, 質粒大小10646bp
發布時間： 2021-07-05 點擊次數： 1860次
1.可轉染極度難轉染的免疫細胞，懸浮細胞，如T細胞，NK細胞、人淋巴細胞、THP-1等;
2.可高效率轉染sirRNA、小分子到任何哺乳動物細胞；
3.轉染細胞后可10小時內快速代謝的第三代新轉染試劑;
轉染條件：
細胞密度：60左右
質粒DNA濃度：648ng/ul
質粒DNA大?。?0646bp
培養板：6孔板
轉染試劑用量：8ul
質粒DNA用量：電訊
轉染試劑：AD600150，Advanced DNA RNA轉染試劑
轉染時間：48小時
血清：z7010-500 胎牛血清
細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液
細胞活力檢測：K009-500，cck8
重要指導方針：
-質粒DNA必須溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中，轉染效率會下降70%，甚至導致轉染失敗。
-質粒DNA必須去內毒素，否則轉染效率會下降70%，甚至導致轉染失敗。
- 在制備轉染復合物時，不能使用其他試劑稀釋核酸或轉染試劑。只需將核酸和轉染試劑按照1:1的關系直接混合即可。否則，轉染效率將下降80%，甚至導致轉染失敗。
-檢查并與轉染試劑混合后，用移液管吹吸10-15次以充分混合，確保管壁無液體殘留。
- 將核酸與轉染試劑混合并在室溫下孵育至少 10-15 分鐘。
- 將復合物加入細胞培養板并輕輕混勻，將板置于 CO 2 培養箱中繼續培養。
- 在整個轉染實驗過程中，細胞可以在*培養基中培養，而不是使用無血清培養基。
- 如果轉染后顯微鏡下觀察到白色或黑色圓形顆粒，則為轉染試劑的新材料顆粒。
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