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細胞培養(yǎng)無小事——如何選擇血清？
發(fā)布時間： 2021-09-29 點擊次數： 1774次體外培養(yǎng)的細胞直接生活在培養(yǎng)基中，因此培養(yǎng)基需要滿足細胞對營養(yǎng)成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求；原代提取的時候選擇如何選擇培養(yǎng)基成了關鍵的問題，此外在細胞提取的時候因血清可以模擬個體的生存環(huán)境，在提取細胞的時候血清一定不可少。
維持細胞生長的營養(yǎng)條件一般包括以下幾個方面：氨基酸，單糖，維生素，無機離子與微量元素，此外還有促生長激素，滲透壓，pH 值，并保證在配制試劑的時候無毒無污染。
正常的培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基無非是基礎培養(yǎng)基加血清。血清是一個神秘的試劑，至今為止，它在細胞的生長繁殖發(fā)揮著重要甚至是難以替代的作用。
血清的主要成分: 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等。
血清主要作用：提供基本營養(yǎng)物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。
血清的判斷標準如下：好的血清應該是透明清亮，土黃色或棕黃色，無沉淀或極少沉淀，比較粘稠。如發(fā)現血清渾濁、不透明、含許多沉淀物，說明血清污染或血清中的蛋白質變性；一般血清反復凍融或者有支原體污染的時候都會出現血清沉淀多的情況，若血清呈棕紅色，說明血清中的血紅蛋白含量太高，取材時有溶血現象；如果搖晃時感覺液體稀薄，說明血清中摻入的生理鹽水太多。如果要進一步了解血清的質量，則應連續(xù)培養(yǎng)某些細胞，觀察細胞生長狀況。
質量一般的血清在使用的時候建議滅活，即56℃30分鐘，主要是為了防止血清中的補體成分對細胞產生毒性，一般的血清不需要滅活，因為加熱也會導致一些刺激因子和蛋白的流失，不利于細胞的生長。
血清一般儲存于－20℃，同時應避免反復凍融。反復凍融會導致血清中的蛋白釋出，從而會沉淀增多，購買大包裝的血清后，首先要滅活處理，然后分裝成小包裝，儲存于－20℃，使用前4度慢融。不同批次的血清會有很大的差異性，為了實驗統(tǒng)一和可重復性，建議購買血清之前先索取試用裝進行測試，選定一批后就要保留足夠使用6個月至1年的量，直至用另一批經過預先試驗的樣品代替。
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