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脂質(zhì)介導的轉(zhuǎn)染為什么是首先選的轉(zhuǎn)染方法？
發(fā)布時間： 2021-10-09 點擊次數(shù)： 2278次在細胞轉(zhuǎn)染實驗中，我們常常要根據(jù)不同的實驗目的，轉(zhuǎn)染細胞的不同，選擇我們將要使用的實驗方法。
脂質(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染是我們的首先選擇，他具有易操作，重復性好，低毒性和適用于懸浮培養(yǎng)體系細胞的特點，在很多轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法效果很好。
其中，脂質(zhì)介導轉(zhuǎn)染試劑的典型，非脂質(zhì)體型FuGENE6和陽離子脂質(zhì)體Lipofectamine2000能夠在有血清的干擾下成功轉(zhuǎn)染細胞，減少轉(zhuǎn)染的操作步驟。
脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染的原理主要是通過靜電作用，將帶有負電荷的DNA與陽離子脂質(zhì)結(jié)合，形成脂質(zhì)-DNA復合體。這樣的復合體較為穩(wěn)定，能夠延緩核酸酶的降解作用。
脂質(zhì)-DNA復合體通過細胞膜的融合，或細胞的內(nèi)吞作用，進入到細胞中。
脂質(zhì)介導法轉(zhuǎn)染除了基因片段，還可以運載大質(zhì)粒。除了瞬時轉(zhuǎn)染，也可以用于建立穩(wěn)定表達的細胞系。
因此，在其他轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下，可以使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法。針對原代細胞或分化細胞，或者轉(zhuǎn)染大質(zhì)粒等高分子質(zhì)量DNA時，也推薦使用脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染。
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