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細胞轉(zhuǎn)染后總是污染，該如何處理？
發(fā)布時間： 2021-11-12 點擊次數(shù)： 7128次有部分同學在做轉(zhuǎn)染時，總會有這樣的疑問：細胞養(yǎng)著沒問題，鋪板第二天也沒問題，狀態(tài)都很好，然后轉(zhuǎn)染第二天早上看就污染了，已經(jīng)重復三次了，回回都是這樣，為啥呀？提的質(zhì)粒用0.45um濾膜過濾了，別的實驗也用了，沒問題。鋪板剩下的細胞放在t25養(yǎng)了，至今狀態(tài)都還很好，只有六孔板里面的污染了，百思不得其解……
針對這方面問題，以下小編整理出幾個解決方案：
1、建議換個液看看，看看鏡頭里面的圖片，像不像典型的污染？如不太像典型污染，那如果液體不澄清，背景臟，那可能真的是污染。沒事兒，正常換液，主要操作的時候別與其他細胞一起操作。每次換液的時候，先用雙抗原液清洗一下細胞。就算是細菌污染也不太要緊，一般通過抗生素洗滌和換液頻率都能夠挽救回來。當然了，如果你的細胞不是很珍貴，那你要評估一下有沒有挽救的必要。
2、可以試試用0.22um濾膜過濾。
3、轉(zhuǎn)染如果自己提質(zhì)粒的話，一般也可不過濾， 用去內(nèi)毒素大抽試劑盒提，大概每個樣100塊，轉(zhuǎn)染后也沒問題。
4、有同學以前做的轉(zhuǎn)染實驗也是會污染，現(xiàn)在是在完培里面加了1%的雙抗，就不會污染了。整個轉(zhuǎn)染實驗過程中只有配制轉(zhuǎn)染試劑時用的純DMEM，其他的給藥和鋪板都用含有雙抗的完培。
以上就是小編整理出來的幾個答案，希望可以幫到廣大同學，轉(zhuǎn)染實驗順順利利，發(fā)表的文章都能見刊～
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