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從原理到實操，蝦青素抗肝纖維化實驗流程！（3）

發(fā)布時間： 2025-04-17　　點擊次數(shù)： 775次

3 C57小鼠肝纖維化模型每周監(jiān)測
在肝纖維化模型建立過程中，每周系統(tǒng)監(jiān)測小鼠的體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進(jìn)展、藥物干預(yù)效果及動物福利的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下為具體操作流程及注意事項：

3.1 監(jiān)測頻率與時間點
監(jiān)測頻率：每周固定時間點（如每周一上午9:00-11:00）監(jiān)測1次。
監(jiān)測周期：
模型誘導(dǎo)期：DMN注射開始至建模完成（通常4-6周）。
干預(yù)治療期：給藥開始至實驗終點（通常4-8周）。

3.2 具體監(jiān)測方法與記錄標(biāo)準(zhǔn)
3.2.1 體重稱量
操作步驟：
1. 設(shè)備準(zhǔn)備：使用精度0.1 g的電子天平，校準(zhǔn)歸零。
2. 小鼠固定：
輕柔抓取小鼠尾部，將其置于專用稱量盒（底部鋪濾紙防滑）。
避免抓握腹部（可能加劇肝區(qū)疼痛）。
3. 稱量記錄：待數(shù)值穩(wěn)定后記錄體重（單位：g），精確至小數(shù)點后1位。
4. 清潔消毒：每次稱量后用75%酒精擦拭稱量盒，防止交叉污染。
5. 計算體重變化率} (%) = - }/} * 100%
6. 異常判定：
顯著下降：連續(xù)2周體重降幅≥10%，或單周降幅≥15%。
顯著上升：排除腹水后，體重增幅≥20%（可能提示代謝異常）。

3.2.2 活動度評估
觀察指標(biāo)：
自主活動：在開放場（如30 cm×30 cm透明箱）中觀察5分鐘，記錄以下行為：
水平運動：穿越區(qū)域次數(shù)（四肢全部進(jìn)入新區(qū)域計1次）。
垂直探索：前肢離地站立次數(shù)（持續(xù)≥1秒）。
靜止時間：無主動移動的累計時間（秒）。
應(yīng)激反應(yīng)：抓取時掙扎強(qiáng)度（輕度/中度/劇烈）。

評分標(biāo)準(zhǔn)（參考改良的Murphy評分）：

記錄與處理：
評分≥2分且持續(xù)48小時，需考慮提前優(yōu)逝。

3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀察
觀察指標(biāo)：
毛發(fā)蓬松度：正常（緊貼皮膚） vs. 蓬松（豎立如“炸毛"）。
光澤度：光滑有光澤 vs. 暗淡無光。
脫毛區(qū)域：記錄脫毛部位（頭頸部、背部、腹部）及面積（直徑cm）。
皮膚損傷：紅斑、結(jié)痂、潰瘍等。

分級記錄：

處理措施：
1級異常：加強(qiáng)墊料清潔，補(bǔ)充維生素（如飲水中添加復(fù)合維生素B）。
2級異常：結(jié)合體重和活動度評估，必要時終止實驗。

3.3 注意事項
1. 減少應(yīng)激：
固定監(jiān)測人員，操作輕柔，避免噪音干擾。
稱重與行為學(xué)觀察在不同時間段進(jìn)行（如上午稱重，下午行為測試）。
2. 環(huán)境控制：
維持SPF級環(huán)境（溫度22-24℃，濕度50-60%），避免環(huán)境波動影響數(shù)據(jù)。
3. 倫理閾值：
體重下降≥20%、活動度評分≥2持續(xù)48小時或嚴(yán)重皮膚損傷，需立即啟動優(yōu)逝程序。

3.4 常見問題與解決方案
通過系統(tǒng)監(jiān)測體重、活動度及毛發(fā)狀態(tài)，可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài)，為實驗結(jié)果的可靠性及倫理合規(guī)性提供保障。

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從原理到實操，蝦青素抗肝纖維化實驗流程！（3）