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一句話知曉實驗方法怎么選？
發布時間： 2021-09-08 點擊次數： 2499次在分子生物學實驗室里的玩法，無非就是用某種特定的刺激物（如細胞活素）去刺激一些細胞或組織，讓它們 high 起來，然后分析細胞對這些外源刺激物的反應，檢測細胞內哪條信號通路被激活或失活，或者什么蛋白被分泌出來。這里面就有很多種方法，哪種最合適，關鍵看你要檢測這個反應的哪個方面的特性。
WB
建立蛋白質的個人檔案
一個典型的免疫印跡實驗（Western Blot，WB）可檢測信號通路中某種蛋白質的特性、表達和分布，分析容量大、敏感度高、特異性強。但至于蛋白-蛋白相互作用則要用另一種更復雜的方法，即免疫共沉淀法（ Coimmunoprecipitation，Co-IP），它接近細胞內的生理情況，是以成為經典方法。
SPR
想知道 Ta 和 Ta 能有多親密？
表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance，SPR）除了研究蛋白-蛋白相互作用（例如受體-配體相互作用），還有可研究小分子-蛋白或細胞-蛋白的相互作用。這種方法不需要標記蛋白（熒光標記或同位素標記），還可以實時定量分析這些相互作用的親和力、熱力學、動力 學特性。SPR 是分析動力學和親和力的金標準。
這些分析用酶聯免疫吸附實驗（EenzymeLinked ImmunosorbentAssay，ELISA）也可以做，原理差不多。
PCR
把小樹養大才能更好地招風
轉錄因子激活并和靶基因結合之后，該基因就被激活。PCR（Polymerase Chain Reaction）或Real Time PCR 可以把特定的 DNA 序列大幅擴增，便于檢測活性基因的表達情況。
ELISA
追蹤到天涯海角！
如果要看看細胞外如何，比如細胞培養上清液或體液中的某種蛋白質分泌情況，則通常選用 ELISA，從而獲知相應基因的活性。
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