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如何培養大鼠平滑肌細胞？
發布時間： 2022-10-24 點擊次數： 1587次一、 器械
顯微器械：眼科剪一把，直彎眼科鑷各一把，細結鑷一把，手術刀一把，針頭諾干
殺老鼠器械：手術剪一把，大鑷子一把，彎眼科鑷一把，組織鉗一把，50ml燒杯一個（錫紙包好）
另外：10ml離心管兩個，培養皿兩個，10ml的瓶子三個，小濾器兩個，硅膠板一塊，培養瓶蓋子諾干二、試劑
D-HANKS液250ml，雙抗2ml（青霉素16萬U/ml鏈霉素15萬U/ml），一型膠原酶，木瓜酶，BSA。后三種加上D-HANKS配成1ml的消化液，終濃度皆為1mg/ml。無血清DMEM和含20％FBS的DMEM三、步驟
1． 取大鼠，稱重，水合氯醛0。3ml/100g腹腔麻醉
2． 綁好大鼠，先剪開腹腔，剪斷腹部大動脈放血，后剪開胸腔，取肺
3． 放入燒杯，后移入超凈臺，置于冰盒上。以后的操作皆在冰盒上操作
4． 倒入已加雙抗的D-HANKS，清洗肺部，扯掉食管，剪掉心臟
5． 用針頭將肺固定在硅膠板上，硅膠板置于培養皿里
6． 用鑷子將肺的內外膜除去，只剩下平滑肌
7． 用眼科剪將肺部剪成1－2mm的小碎塊
8． 將碎塊移入配好的消化液中，放入培養箱中，消化15min
9． 取出，加入無血清的DMEM，約10ml，移入離心管中
10． 980轉/min，離心10min
11． 倒掉上清，加入約1ml含20％FBS的DMEM
12． 將碎塊用滴管加入25ml的培養瓶里，液體不要加多，有種濕濕的感覺即可。一到兩天可以再加點液體
13． 大概五到七天可以爬出以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊。
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