清纯校花被c得欲仙欲死,亚洲大尺度无码无码专线一区,凹凸在线无码免费视频

技術文章ARTICLE

您當前的位置：首頁 > 技術文章 > 前列腺上皮
前列腺上皮

發(fā)布時間： 2022-12-13　　點擊次數(shù)： 1666次

原理
取出前列腺和處理標本（30 min），用膠原蛋白酶消化前列腺組織（1 h），收集單個細胞和小的細胞團（1 h）。接種細胞，培養(yǎng)至形成單層（7 d）。
材料與儀器
胎牛血清或馬血清青霉素卡那霉素霍亂毒索地塞米松 EGF 羊催乳激素或鼠催乳激素胰島素部分精制的前列腺調(diào)理素或精制的前列腺調(diào)理素 I型膠原蛋白酶大鼠
生長培養(yǎng)液鹽性培養(yǎng)液
Petri培養(yǎng)皿手術剪注射器和14-G插管 25ml Erlenmeyer燒瓶金屬絲濾網(wǎng) 50ml錐形塑料離心管尼龍濾網(wǎng) 24孔塑料培養(yǎng)板振蕩水浴箱離心機血細胞計數(shù)板或Coulter計數(shù)器
步驟
在無菌條件下，取出理想的前列腺葉，放入滅菌過的 60 mm Petri 培養(yǎng)皿（玻璃或塑料的，直徑為 60 mm）。

2. 剪除前列腺葉的脂肪，然后稱重。

3. 加入 2 ml 膠原蛋白酶（675 U/ml，用含有 100 U/ml 青霉素和 100 μg/ml 卡那霉素的 MSS 配制）。

4. 用手術剪將前列腺葉剪成約 1 mm 大小的組織塊。組織塊應小，足夠通過 14-G 插管。

5. 用注射器和 14-G 插管將組織塊移于滅菌過的 25 ml Erlenmeyer 燒瓶，然后加入膠原蛋白酶，每 0.1 g 濕組織加入 1 ml。

6. 置于振蕩水浴箱，在 37°C 條件下孵育 1 h 。

7. 分 3 次用 14-G 插管吸出消化的細胞懸液，然后用孔徑為 1 mm 的金屬絲濾網(wǎng)（孔徑為1 mm，與 50 ml 錐形離心管配用）將細胞懸液濾入 50 ml 圓錐形塑料離心管，以除去碎片和未消化的組織。加入等量含有 5 % 胎牛血清或馬血清的 MSS，浸洗細胞懸液。

8. 在 4°C 條件下離心（100 g，5 min），收集細胞。

9. 用 5 ml 含有 5 % 血清的 MSS 混懸細胞，然后依次用孔徑為 250 μm 、150 μm、100 μm 和 40 μm 的尼龍濾網(wǎng)（與 50 ml 錐形離心管配用）過濾細胞懸液，并每次用 5 ml 含有 5 % 血清的 MSS 沖洗濾網(wǎng)。

10. 通過離心收集細胞，然后用 5 ml WAJC404 培養(yǎng)液混懸細胞。

11. 計數(shù)細胞，將細胞濃度調(diào)整至 4×106 個/ml。

12. 將細胞接種于 24 孔板，每孔（面積約為 2 cm2）接種 50 μl 細胞懸液（含有 2×105 個細胞）。每孔內(nèi)有 1 ml WAJC404 培養(yǎng)液、10 ng/ml 霍亂毒素、1 μmol/L 地塞米松、10 ng/ml EGF、1 μg/ml 催乳激素、5 μg/ml 胰島素、10 ng/ml 前列腺調(diào)理素、100 U/m 青霉素和 100 μg/ml 鏈霉素。可按 McKeehan 等 [1984] 以及 Chaproniere 和 McKeehan [1986] 敘述的方法替代部分精制的前列腺調(diào)理素。

13. 在 95 % 空氣和 5 % CO2 的濕潤環(huán)境和 37°C 條件下培養(yǎng)。第 3 天和第 5 天換液。第 7 天細胞可能接近單層。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)

下一篇：染料排斥法測定細胞生存力實驗

上一篇：瓊脂中克隆培養(yǎng)

產(chǎn)品中心 Products

lishankj.com-美国式禁忌2,黑人刚破完处就三p,少妇被爽到高潮喷水,性猛交╳xxx乱大交

前列腺上皮

原理

材料與儀器

步驟