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染料攝取法測(cè)定細(xì)胞生存力實(shí)驗(yàn)

發(fā)布時(shí)間： 2022-12-13　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1517次

原理
細(xì)胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色，用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
材料與儀器

步驟

材料

無(wú)菌

單細(xì)胞懸液
雙醋酸熒光素，10ug/ml，溶于 HBSS
碘化丙啶，500ug/ml

非滅菌

熒光顯微鏡
濾光片
熒光素：激發(fā) 450/590 nm ，發(fā)射 LP 515 nm
碘化丙啶：激發(fā) 488nm ，發(fā)射 615 nm

操作步驟

1. 細(xì)胞懸液的制備與染料排斥法相同（見(jiàn)方案 22.1)，但是生長(zhǎng)液中不含酚紅。
2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液，二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml，碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :
3. 將細(xì)胞置于 37°C , 溫育 10 min。
4. 將一滴細(xì)胞滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，用熒光顯微鏡觀察。

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